萊恩德大腸肝菌檢測儀檢測大腸菌群的方法步驟
作者：admin 發(fā)布時間：2021-07-14 01:49:38 瀏覽次數 :641
萊恩德大腸肝菌檢測儀檢測大腸菌群的方法步驟：
1、適用范圍：適用于各類食品、原料和純凈水等樣品中大腸菌群的快速檢測。
2、檢測原理：將乳糖、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上，經培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性，記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數，根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。
3、分析特點：與國標法中的九管法相對應，將原來幾步的試驗簡化為一步，時間由78h縮短為24h以內，省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。
4、方法步驟
（1）樣品處理：無菌稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL滅菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯中，經充分振搖做成1：10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1：10樣品勻液，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內，振搖試管制成1：100的稀釋液。以此類推，每個稀釋度更換一支滅菌吸管。
（2）接種：選取兩個稀釋度進行接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩個稀釋度，飲料和飲用水采用原液和1：10兩個稀釋度。每份由三片大紙片（接10mL）,六片小紙片（接1mL）組成,大片每小袋二張疊放算作一片。用滅菌吸管吸取10 mL 1：10稀釋液加到含有大紙片的塑料袋中（相當于接樣品1g），吸透后平放，做三個重復。再用1mL滅菌吸管吸取1 mL同一稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中（相當于接樣品0.1g），做三個重復。再取一支1 mL滅菌吸管吸取1 mL 1：100稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中（相當于接樣品0.01g），做三個重復。
（3）培養(yǎng)：將接種好的紙片（可疊放）放入37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15h～24h。
5、結果判斷與計數：若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫蘭色不變或在紫蘭色背景上呈現(xiàn)紅色斑點，但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數，根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。如接種的第一個稀釋度的稀釋液為原液，應將表上查出的結果除以10，以此類推。
6、注意事項：如果樣品的酸堿度在pH7以下，應先用滅菌1mol/L氫氧化鈉（NaOH）調節(jié)溶液調至中性，避免因pH的原因導致的紙片變黃而影響結果觀察。
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